鈣黃綠素Calcein活細胞染色專家分享相關(guān)事項
鈣黃綠素Calcein活細胞染色專家細胞活體染色可增加質(zhì)壁分離實驗效果：植物細胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原”這一實驗，在教科書中指出：該實驗材料是紫色的洋蔥，不需染色可直接觀察到液泡體積大小的變化。洋蔥的表皮，實際上只有外表皮呈現(xiàn)出紫色，但對于初學(xué)者來說極難取到只有單層細胞的觀察材料，多層細胞的材料往往相互重疊呈象，觀察效果很不理想。在實踐中我們發(fā)現(xiàn)洋蔥的內(nèi)表皮的撕取很易獲得只具有單層細胞的薄膜材料，但內(nèi)表皮卻又是無色透明的，用其直接作觀察材料，顯然效果也不理想。我們通過反復(fù)摸索，發(fā)現(xiàn)對洋蔥細胞活體染色后，再取內(nèi)表皮做質(zhì)壁分離和復(fù)原實驗，實驗效果就好多了。具體作法如下：用小刀在鱗片內(nèi)側(cè)劃成約2cm2的小塊，將取下的小塊放入0.03%的中性紅色溶液中染色10～15min。取出小塊稍加沖洗后，兩手握住處理過的鱗片兩側(cè)并朝內(nèi)表皮方向?qū)φ邸＜纯陕冻鰩Ъt色的薄膜內(nèi)表皮。用鑷子取小片內(nèi)表皮制片觀察，會看到細胞的細胞壁染成了醒目的紅色，其他部分仍為無色。此時細胞的原生質(zhì)與細胞壁的對比十分明顯，質(zhì)壁分離與復(fù)原的效果也十分理想。
在操作中我們還發(fā)現(xiàn)也可以先單獨將內(nèi)表皮染上顏色，然后放在清水中浸泡十來分鐘，可褪去細胞壁的顏色，但染成桃紅色的液泡的顏色不會褪去，再將內(nèi)表皮制片做質(zhì)壁分離與復(fù)原的實驗效果更為理想。
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