基本信息
貨號(hào)：17030（25 mg）
儲(chǔ)存方式：-20℃避光
結(jié)構(gòu)式：
分子量：307.09
外觀：白色
儲(chǔ)存：DMSO
生物應(yīng)用
5-溴-2-脫氧尿苷（BrdU）是胸苷的類似物，可以摻入新合成的復(fù)制細(xì)胞DNA（S期細(xì)胞）中。 BrdU通常用于檢測(cè)活組織中的增殖細(xì)胞。 它通過在DNA復(fù)制過程中取代胸苷并將其自身整合到新合成的DNA中（在S期期間）起作用。 然后可以使用對(duì)BrdU特異的抗體來檢測(cè)摻入的化學(xué)物質(zhì)，從而指示活躍地復(fù)制其DNA的細(xì)胞。 因?yàn)?/span>BrdU可以在細(xì)胞分裂的S期中替代胸苷，它可以引起突變。
染色細(xì)胞樣本分析
以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。生長(zhǎng)培養(yǎng)基，細(xì)胞密度，其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響Brdu摻入。
1）。 制備1-10mM DMSO儲(chǔ)備溶液。 如果儲(chǔ)存在-20°C，DMSO儲(chǔ)備溶液可以使用6個(gè)月。
2）。 通過離心沉淀細(xì)胞并將細(xì)胞重懸于完全生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。
3）。 使用5和20μM之間的濃度添加Brdu染色，并將其孵育60分鐘至過夜。 孵育時(shí)間取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)。
4）。 用70-80％酒精或酸 - 乙醇固定細(xì)胞20-30分鐘。
5）。用PBS洗滌（3次，每次2分鐘）。
6）。 繼續(xù)進(jìn)行**細(xì)胞化學(xué)染色。
參考文獻(xiàn)
1. Zeng Y, Wang Y. (2006) Sequence-dependent formation of intrastrand crosslink products from the UVB irradiation of duplex DNA containing a 5-bromo-2'-deoxyuridine or 5- bromo-2'-deoxycytidine. Nucleic Acids Res.
2. Kuwagata M, Ogawa T, Nagata T, Shioda S. (2006) The evaluation of early embryonic neurogenesis after exposure to the genotoxic agent 5-bromo-2'-deoxyuridine in mice. Neurotoxicology.
3. Sahambi SK, Hales BF. (2006) Exposure to 5-bromo-2'-deoxyuridine induces oxidative stress and activator protein-1 DNA binding activity in the embryo. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 76, 580.