Fluo4是一種將Fluo3結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強(qiáng)的F,它的*大激發(fā)波長(zhǎng)會(huì)向短波長(zhǎng)處偏離10nm左右。這個(gè)波長(zhǎng)更接近于氬激光器的波長(zhǎng),所以用氬激光器激發(fā)時(shí),F(xiàn)luo4的熒光強(qiáng)度比Fluo3強(qiáng)1倍。 由于Fluo4與鈣離子的親和力和Fluo3近似(Fluo 3:Kd=0.4 μmol/l、Fluo 4: Kd=0.36 μmol/l),所以使用上和Fluo3也基本相同,可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀等儀器檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
主要結(jié)合dsDNA;結(jié)合小溝的AT。DAPI也結(jié)合RNA,但其發(fā)射峰波長(zhǎng)(500nm)要長(zhǎng)于DAPI/dsDNA(460nm)。
DAPI dilactate更水溶。在用于組織染色、未固定細(xì)胞和組織染色時(shí),下述方法可加以修改。
保存:10mg/單位,室溫避光保存,小瓶?jī)?nèi)至少一年。制stock液,溶解100uM (DAPI dihydrochloride二鹽酸化物分子量為350.3;DAPI dilactate分子量為457.5)DAPI于去離子水中或DMF(二甲基甲酰胺),4℃避光可保存6個(gè)月。DAPI是誘變劑,水溶液可通過活性炭去除,要**處理。
染色:在所有染色完成后進(jìn)行復(fù)染,不需要另外的固定和通透處理。
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