線粒體染色試劑盒使用注意事項(xiàng)： M16染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對(duì)其進(jìn)行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。
細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求、細(xì)胞類型、細(xì)胞的膜通透性等進(jìn)行優(yōu)化，確定zui佳條件。
線粒體染色試劑盒染色工作液配制：
根據(jù)樣本數(shù)量，用染料稀釋液將BBcellProbeTM M16熒光染料100倍稀釋，再用相應(yīng)的培養(yǎng)基或者HBSS緩沖液20-400倍稀釋（對(duì)于后續(xù)需要做固定或透化的樣本，20-100倍稀釋），配制成染色工作液。
【注】:
也可以直接用相應(yīng)的培養(yǎng)基或HBSS等緩沖液稀釋M16染料母液至所需濃度。
建議收到產(chǎn)品后，根據(jù)單次使用量，對(duì)母液進(jìn)行小量分裝，每次使用一管，試劑-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。
開始實(shí)驗(yàn)前，使用培養(yǎng)基或HBSS緩沖液稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作濃度。工作濃度為根據(jù)不同細(xì)胞的預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定的zui佳工作濃度，一般染色終濃度2000-40000倍稀釋。
為了降低過度加載染料導(dǎo)致的潛在背景和線粒體毒性，在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下應(yīng)盡可能低濃度染色。另外，濃度過高也可能造成非特異性染色，對(duì)其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。
工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
為了降低探針加載過度可能引起的假陽性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。
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