百螢教您選擇正確的ROS探針,正確的選擇讓實驗不再迷茫。活性氧(ROS)是化學(xué)反應(yīng)性的含氧化學(xué)物質(zhì),其作為細(xì)胞代謝的副產(chǎn)物而產(chǎn)生。 在動物細(xì)胞中,ROS的產(chǎn)生通常發(fā)生在線粒體中。 在植物細(xì)胞中,ROS也可以在葉綠體中產(chǎn)生。 *近,已顯示ROS在過氧化物酶體和各種細(xì)胞類型的質(zhì)膜氧化酶中產(chǎn)生。
活性氧對細(xì)胞的危害
1 對核酸的氧化損傷
受到氧化損傷后的DNA可能會發(fā)生斷裂、突變以及對熱穩(wěn)定性改變等,從而嚴(yán)重影響了遺傳信息的正常轉(zhuǎn)錄、翻譯過程。
2 對蛋白質(zhì)的氧化損傷
活性氧對蛋白質(zhì)的作用包括修飾氨基酸,使肽鏈斷裂,形成蛋白質(zhì)的交聯(lián)聚合物,改變構(gòu)像和**原性等5個方面。
3 修飾氨基酸
4 使肽鏈斷裂
5 形成蛋白質(zhì)交聯(lián)聚合物
6 改變構(gòu)像
7 改變**原性
8 損傷生物膜,導(dǎo)致細(xì)胞和機(jī)體的能量代謝障礙
檢測目標(biāo)
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作用目標(biāo)
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探針
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貨號
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原理
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羥基(?OH)
當(dāng)超氧陰離子與過渡金屬反應(yīng)時可以產(chǎn)生。極度反應(yīng)??梢耘cDNA骨架上的氫反應(yīng),導(dǎo)致鏈斷裂。
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活細(xì)胞/細(xì)胞提取物
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MitoROS?OH580
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16055
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探針能夠自由地進(jìn)入活細(xì)胞,其中活細(xì)胞被游離羥基特異性氧化。激發(fā)后,氧化的探針發(fā)出紅色熒光
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總ROS
包括過氧化氫,超氧陰離子,羥基自由基,單線態(tài)氧,一氧化氮,過氧化丁基和次氯酸
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活細(xì)胞/ 細(xì)胞提取物
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ROS?Brite 570
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16000/22902
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探針被動地滲透完整的細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),探針就被細(xì)胞內(nèi)的ROS氧化。探針也可以在溶液中被ROS氧化,用于細(xì)胞提取物測定。激發(fā)后,探針發(fā)出熒光信號
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ROS?Brite 670
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16002/22901
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ROS?Brite 700
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16004/22903
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Amplite?ROS綠色
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22900
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檢測目標(biāo)
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探針
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貨號
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原理
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SOD歧化酶(SOD)
催化超氧化物轉(zhuǎn)化(即歧化)成氧和過氧化氫
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Amplite?比色超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒
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11305
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首先使用黃嘌呤氧化酶(XO)將黃嘌呤轉(zhuǎn)化為過氧化氫和尿酸,同時催化分子氧(O2)還原成超氧陰離子(O2-)。 然后使用ReadiView?SOD560對超氧化物歧化進(jìn)行競爭性抑制,以量化超氧化物歧化酶活性。 ReadiView?SOD560吸光度的降低與SOD活性成正比。
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過氧化氫酶
幾乎無處不在的抗氧化酶,將過氧化氫轉(zhuǎn)化為水和分子氧
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Amplite?熒光過氧化氫酶檢測試劑盒(紅色)
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11306
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競爭性抑制試驗。 Amplite?Red探針通過過氧化氫氧化活化。 因此,探針與過氧化氫酶競爭氫過氧化物酶底物。 Amplite Red吸光度與過氧化氫酶活性成反比。
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谷胱甘肽(GSH)
非常重要的氧化還原化合物 它是谷胱甘肽 - 抗壞血酸循環(huán)的主要成分,可將過氧化氫轉(zhuǎn)化為水
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Thiolite?綠色
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10056
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在與谷胱甘肽反應(yīng)后探針被激活。 激發(fā)后,探針釋放綠色熒光。
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Amplite?熒光谷胱甘肽GSH / GSSG比率分析試劑盒
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10060
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使用Thiolite?Green探針,在與谷胱甘肽(GSH)反應(yīng)后激活,以定量谷胱甘肽。 氧化型谷胱甘肽(GSSG)通過測量酶催化還原GSSG至GSH之前和之后的GSH濃度來確定。 通過從總GSH中減去初始GSH(酶反應(yīng)前)(酶反應(yīng)后)來計算GSSG濃度。
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谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)
催化GSH氧化成GSSG并將過氧化氫轉(zhuǎn)化為水
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Amplite?熒光谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒(藍(lán)色)
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11560
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酶循環(huán)測定。 谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)催化谷胱甘肽從GSH氧化成GSSG。 谷胱甘肽還原酶(GR)然后用輔酶NADPH催化GSSG還原成GSH,輔酶NADPH被氧化成NADP +。 然后,Quest Fluor?NADP探針量化NADP +的水平,其與原始GPx活性成正比。
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抗壞血酸
也稱為抗壞血酸或維生素C,它是谷胱甘肽 - 抗壞血酸循環(huán)的主要成分,可將過氧化氫轉(zhuǎn)化為水
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Amplite?熒光抗壞血酸檢測試劑盒(藍(lán)色)
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13835
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依賴于通過酶催化反應(yīng)將抗壞血酸脫氫成脫氫抗壞血酸(DHA)。 得到的DHA由Ascorbrite Blue探針定量。
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NAD+/ NADH
ATP合成中主要成分發(fā)生在線粒體中。 該輔酶被認(rèn)為與超氧化物的產(chǎn)生有關(guān),其產(chǎn)率取決于NAD + / NADH比率。
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Amplite?NAD / NADH試劑盒
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15273/15258/15275/15280/15263/15257/15261/15262/15291/15290/15259/15271
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通常,使用NAD +特異性探針來量化NAD +濃度。 NAD + / NADH比率通過酶循環(huán)測定確定。
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NADPH
在谷胱甘肽 - 抗壞血酸循環(huán)中充當(dāng)電子供體,將過氧化氫轉(zhuǎn)化為水
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Amplite?NADPH試劑盒
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15274/15272/15260/15276/15264/15262/15259/15291/15290
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通常,使用NADPH特異性探針來量化NADPH濃度。 NADP / NADPH比率通過酶循環(huán)測定確定。
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