Fluo-3和Fluo-4是*常用的可見(jiàn)光可激發(fā)的鈣離子指示劑。然而，Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后僅在活細(xì)胞中發(fā)生中度熒光，并且需要苛刻的細(xì)胞負(fù)載條件來(lái)*大限度的提高細(xì)胞鈣反應(yīng)。Fluo-8®染料已被開(kāi)發(fā)用于改善細(xì)胞負(fù)載和鈣響應(yīng)，同時(shí)保持方便的Fluo-3和Fluo-4光譜波長(zhǎng)，*大激發(fā)波長(zhǎng)為~490 nm，*大發(fā)射波長(zhǎng)為~520 nm。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)，FLUO-8 ® AM只需要在室溫下培養(yǎng)，而Fluo-3 AM和的Fluo-4 AM則需要在37℃溫育需要。此外，F(xiàn)luo- 8®AM比Fluo-4 AM亮2倍，比Fluo-3 AM亮4倍。AAT Bioquest提供了一系列不同鈣親和力出色的Fluo-8 ®試劑。
Fluo-8® AM的主要特點(diǎn)：
? 在室溫條件下，比Fluo-3 AM和Fluo-4 AM更快，更容易裝入細(xì)胞。
? 比細(xì)胞中的Fluo-3 AM和Fluo-4 AM 更亮。
? 與Fluo-4 AM的光譜幾乎完全相同，十分方便。
圖1.用Fluo-8®AM（貨號(hào) 21080）和Fluo-4 AM在HEK-293細(xì)胞中測(cè)量卡巴酚劑量反應(yīng)。HEK-293細(xì)胞在96孔黑壁/透明底肋片中以40000個(gè)細(xì)胞/100μl/孔接種過(guò)夜。去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，在室溫下用100μl含F(xiàn)luo-8®AM或Fluo-4 AM的染色液培養(yǎng)細(xì)胞1小時(shí)。通過(guò)NOVOstar添加卡巴膽堿（25μL/孔）以達(dá)到*終指示的濃度。在Ex / Em = 490 / 525nm下測(cè)量熒光信號(hào)。用Fluo-8測(cè)得卡巴膽堿的EC50 ® AM為約1.2μM。
圖2.在Costar 96孔黑壁/透明底板中以每孔100μL每孔40,000個(gè)細(xì)胞接種U2OS細(xì)胞過(guò)夜。去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，37℃的HHBS中將細(xì)胞用100μL的4μM的Fluo-3 AM，F(xiàn)luo-4 AM和Fluo-8® AM（貨號(hào)：21080）孵育1小時(shí)。用200μLHHBS洗滌細(xì)胞兩次，然后使用FITC通道用熒光顯微鏡成像。
表2. Fluo-8®鈣離子指示劑
|
貨號(hào)
|
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
規(guī)格
|
價(jià)格
|
|
21080
|
F1uo-8?®，AM
|
1mg
|
2100
|
|
21081
|
Fluo-8?®，AM
|
5x50 ug
|
1140
|
|
21082
|
Fluo-8?®，AM
|
10*50ug
|
2100
|
|
21083
|
Fluo-8?®，AM
|
20*50ug
|
3540
|
|
21086
|
Fluo-8®，鈉鹽
|
1mg
|
3540
|
|
21087
|
Fluo-8®，鉀鹽
|
1mg
|
3540
|
|
21088
|
Fluo-8®，鈉鹽
|
10x50 ug
|
2340
|
|
21089
|
Fluo-8®，鉀鹽
|
10*50ug
|
2340
|
|
21090
|
Fluo-8H?, AM
|
1mg
|
3540
|
|
21091
|
Fluo-8H?, AM
|
10*50ug
|
2340
|
|
21095
|
Fluo-8H?, 鈉鹽
|
10*50ug
|
2340
|
|
21096
|
Fluo-8L?, AM
|
1mg
|
3540
|
|
21097
|
Fluo-8L?, AM
|
10*50ug
|
2340
|
|
21098
|
Fluo-8L?, 鈉鹽
|
10*50ug
|
2340
|
|
21099
|
Fluo-8L?, 鈉鹽
|
1mg
|
3540
|
|
21100
|
Fluo-8L?, 鉀鹽
|
10*50ug
|
2340
|
|
21101
|
Fluo-8L?, 鉀鹽
|
1mg
|
3540
|
|
21102
|
Fluo-8FF?,鉀鹽
|
10*50ug
|
2340
|
|
21103
|
Fluo-8FF?,鉀鹽
|
1mg
|
3540
|
|
21104
|
Fluo-8FF?, AM
|
10*50ug
|
2340
|
|
21105
|
Fluo-8FF?, AM
|
1mg
|
3540
|
|
36307
|
Screen Quest?Fluo-8鈣檢測(cè)試劑盒 *適合于難檢測(cè)細(xì)胞系
|
1 Plate
|
1140
|
|
36308
|
Screen Quest?Fluo-8鈣檢測(cè)試劑盒 *適合于難檢測(cè)細(xì)胞系
|
10Plate
|
4140
|
|
36309
|
Screen Quest?Fluo-8鈣檢測(cè)試劑盒 *適合于難檢測(cè)細(xì)胞系
|
100Plate
|
29400
|
|
36314
|
Screen Quest 免洗Fluo-8鈣檢測(cè)試劑盒
|
1 Plate
|
1140
|
|
36315
|
Screen Quest 免洗Fluo-8鈣檢測(cè)試劑盒
|
10Plate
|
4140
|
|
36316
|
Screen Quest 免洗Fluo-8鈣檢測(cè)試劑盒
|
100Plate
|
35400
|
百螢生物是 AAT Bioquest 中國(guó)區(qū)域上等代理商，為國(guó)內(nèi)提供 AAT 的原裝產(chǎn)品及產(chǎn)品定制、技術(shù)服務(wù)，歡迎咨詢(xún)、訂購(gòu)！