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西安百螢生物科技有限公司 主營(yíng):百螢生物圍繞熒光發(fā)光、熒光標(biāo)記、熒光探針等技術(shù)進(jìn)行產(chǎn)品研發(fā),公司產(chǎn)品廣泛用于核酸蛋白定量、細(xì)胞凋亡研究、細(xì)胞信號(hào)通路研究、細(xì)胞及線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)、細(xì)胞器染色、活體示蹤、抗體標(biāo)記等科研領(lǐng)域。
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公司新聞

用于GPCR和鈣離子通道功能分析的一系列鈣指示劑(二)

用于GPCR和鈣離子通道功能分析的一系列鈣指示劑(二)

上次,我們系統(tǒng)的介紹了AAT Bioquest的鈣離子熒光探針,今天百螢為大家具體介紹一下AAT Bioquest的鈣離子綠色熒光探針與市售的其他綠色探針的對(duì)比數(shù)據(jù)。將所有的鈣離子綠色熒光探針?lè)旁谝黄穑鼈兊募ぐl(fā)發(fā)射光線(xiàn)有多大差異?哪款產(chǎn)品的相對(duì)亮度更高?細(xì)胞內(nèi)保留時(shí)間更長(zhǎng)?細(xì)胞加載時(shí)間更短?AAT Bioquest*亮的綠色鈣離子熒光探針的性能如何?感興趣的朋友一起來(lái)看看吧!



綠色鈣離子熒光探針的比較

產(chǎn)品名稱(chēng) Ex/Em(nm) (信號(hào)背景比)S/B 相對(duì)亮度 細(xì)胞內(nèi)保留 加載時(shí)間 其他
Fluo-3 506/526 2 50 相比*低 1 h 在相同條件下,Calbryte探針的亮度明顯更高
Fluo-4 494/516 4.5 100 1 h
Fluo-8 490/514 4.5 ~200 0.5-1 h
Cal-520 492/514 9.0 ~150 1-2 h
Calbryte-520 490/514 10.0 ~350 0.5-1 h

Calbryte-520的主要功能:

1.異常明亮
2.在細(xì)胞中比Fluo-3和Fluo-4大大提高了信噪比
3.明顯增強(qiáng)的細(xì)胞內(nèi)保留(減少甚至消除了丙磺舒的使用)
4.更快的細(xì)胞加載

圖1.各種綠色鈣離子熒光指示劑對(duì)比圖。




Calbryte 520與市售的其他綠色鈣離子指示劑的各類(lèi)數(shù)據(jù)對(duì)比

內(nèi)源性Gq的鈣含量測(cè)定---Calbryte 520 vs. Fluo-4

圖2.用熒光顯微鏡ATP誘導(dǎo)CHO-K1細(xì)胞內(nèi)源性P2Y受體反應(yīng)。Calbryte 染料產(chǎn)生更亮的信號(hào),更高的信噪比,并大大增強(qiáng)了細(xì)胞保留能力。


外源Gq的鈣含量測(cè)定---Calbryte 520 vs. Fluo-4


Calbryte 520無(wú)丙磺舒免洗試劑盒與FLIPR Calcium 4檢測(cè)試劑盒數(shù)據(jù)分析

圖3.CHO-K1細(xì)胞中內(nèi)源性P2Y受體對(duì)ATP的熒光信號(hào)響應(yīng)的比較。 將CHO-K1細(xì)胞以50,000個(gè)細(xì)胞/ 100 μL /孔在黑色96孔板中接種過(guò)夜。 使用Screen Quest Calbryte 520無(wú)丙磺舒和免洗的鈣測(cè)定試劑盒(紅色),F(xiàn)LIPR鈣4測(cè)定試劑盒(藍(lán)色)和Fluo-4直接鈣測(cè)定試劑盒(綠色)測(cè)量鈣通量響應(yīng)。 FlexStation 3添加了ATP(50 μL /孔)以達(dá)到*終指示的濃度。


Calbryte 520和Fluo-4在GPCR(Gi)靶向難標(biāo)記受體中的應(yīng)用數(shù)據(jù)對(duì)比

圖4.Rantes在Flexstation中刺激了趨化因子受體5(CCR5)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞(Cat#38105)中的鈣反應(yīng)(注:上方,深綠色線(xiàn)條為Calbryte 520;下方,淺綠色線(xiàn)條為Fluo-4)


Calbryte 520與GPCR(Gi)目標(biāo)間接cAMP檢測(cè)的應(yīng)用


圖5.嵌合G蛋白(Gqi,Gqo,Gqs,Gqz)或混雜G蛋白(Gα16)可以與Gi,Go或Gs蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合,產(chǎn)生外源性細(xì)胞內(nèi)鈣信號(hào)。

圖6.使用Calbryte-520 PBX NW試劑盒(#36318)在CHO-Ga16-NOP細(xì)胞(#38100)中測(cè)量了傷害感受肽刺激的鈣反應(yīng)。




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貨號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格
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20050 細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè) Pluronic F-127 10g
20052 細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè) Pluronic F-127 20% DMSO溶液 10ml
20053 細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè) Pluronic F-127 10%水溶液 10ml
20060 丙磺舒 細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè) 10x72mg
20061 丙磺舒 ReadiUse 鈉鹽 水溶性 10x77mg
20062 丙磺舒 ReadiUse 25 mM穩(wěn)定的水溶液 10x10ml
36312 Cell Meter 鈣檢測(cè)免洗和免丙磺舒檢測(cè)試劑盒*適用于酶標(biāo)儀* 100Tests
20550 Fluo-4 AM 1mg
21010 Fluo-3 AM 1mg
21080 Fluo-8 AM 1mg

百螢生物是美國(guó)AAT Bioquest中國(guó)區(qū)域代理商,為您提供AAT Bioquest*上等的產(chǎn)品、*詳盡的技術(shù)和*前沿的資訊,歡迎來(lái)電咨詢(xún)!

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