雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑選擇指南
今天，百螢為大家精選了AAT Bioquest市售的雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑，它有哪些產(chǎn)品？它與單波長(zhǎng)鈣指示劑有什么區(qū)別？它有什么優(yōu)勢(shì)？如何選擇五花八門的雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑？感興趣的小伙伴一起來看看吧！
雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑
與單波長(zhǎng)鈣指示劑相比，雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑具有獨(dú)特的光譜特性，這些光譜特性是響應(yīng)結(jié)合鈣而觸發(fā)的。當(dāng)與鈣結(jié)合時(shí)，比例指示劑的*佳吸收率或發(fā)射波長(zhǎng)強(qiáng)度都會(huì)發(fā)生變化。例如，雙激發(fā)鈣指示劑Fura-2，AM和Fura-8 ，AM在結(jié)合和不含鈣時(shí)均顯示兩個(gè)峰值激發(fā)波長(zhǎng)。當(dāng)分別在結(jié)合鈣的和無鈣的峰值激發(fā)波長(zhǎng)下激發(fā)時(shí)，鈣濃度的增加會(huì)引發(fā)雙激發(fā)指示劑的熒光發(fā)射強(qiáng)度的增加和減少。
雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑的優(yōu)勢(shì)：
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比例測(cè)定可準(zhǔn)確測(cè)量細(xì)胞內(nèi)鈣濃度
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減少不均勻的染料加載，染料滲漏，光漂白和變化的細(xì)胞厚度（在混合種群中常見）的影響
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提供更可靠和可重復(fù)的結(jié)果
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雙重激發(fā)或雙重發(fā)射的指示劑
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活細(xì)胞鈣分析的細(xì)胞滲透形式（與成像，流式細(xì)胞儀和微孔板檢測(cè)（例如HTS）兼容）
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細(xì)胞不滲透形式，可通過微量注射，貼片移液器等進(jìn)行上樣
圖1.測(cè)量CHO-K1細(xì)胞的ATP劑量響應(yīng)。使用Fura-2 AM（#21023）和Fura-8 AM（#21056）。將CHO-K1細(xì)胞以40,000個(gè)細(xì)胞/ 100 μL /孔在黑色96孔板中接種過夜，然后與Fura-2 AM或Fura-8 AM鈣測(cè)定染料上樣溶液孵育1小時(shí)。ATP劑量由Flexstation添加。
雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑選擇指南
下表列出了細(xì)胞滲透性雙波長(zhǎng)比率鈣指示劑的規(guī)格，其吸收和發(fā)射*大值以及其鈣解離常數(shù)等。請(qǐng)根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)選擇*佳的試劑。(其他形式的試劑如鈉鹽、鉀鹽等，請(qǐng)參考下文“相關(guān)產(chǎn)品”)
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Fura-2,AM
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Fura-FF,AM
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Fura-8 ,AM
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Fura-8FF,AM
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Fura Red,AM
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Indo-1,AM
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Cal Red R525/650,AM
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熒光產(chǎn)生原理
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與鈣結(jié)合后比例激發(fā)波長(zhǎng)發(fā)生變化
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與鈣結(jié)合后比例發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)生變化
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熒光變化原理
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激發(fā)波長(zhǎng)變化
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發(fā)射波長(zhǎng)變化
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Ex / Em（nm）
（不結(jié)合鈣時(shí)）
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340/510
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340/510
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354/524
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354/524
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435/650
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355/475
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490/660
|
Ex / Em（nm）
（結(jié)合大量鈣時(shí)）
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380/510
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380/510
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415/524
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415/524
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471/650
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355/400
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490/525
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? d
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145 nM
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5.5 μM
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260 nM
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6 μM
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400 nM
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230 nM
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330 nM
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形式
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AM酯
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AM酯
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AM酯
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AM酯
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AM酯
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AM酯
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AM酯
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滲透性
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細(xì)胞可滲透
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細(xì)胞加載
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通過細(xì)胞培養(yǎng)基加載到活細(xì)胞中
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規(guī)格
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20x50 μg
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10x50 μg
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1 mg
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10x50 μg
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1 mg
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20x50 μg
|
10x50 μg
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貨號(hào)
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21023
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21027
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21055
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20620
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21046
|
21036
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20591
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相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào)＃
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產(chǎn)品名稱
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Ex（nm）
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Em(nm)
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規(guī)格
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20588
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Cal Red R525 / 650鉀鹽
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492
|
650
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5x50 ug
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20590
|
Cal Red R525 / 650 AM
|
492
|
650
|
1mg
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|
20591
|
Cal Red R525 / 650 AM
|
492
|
650
|
10x50 ug
|
|
20620
|
Fura-8FF ，AM
|
354
|
525
|
10x50 ug
|
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20621
|
Fura-8FF ，五鉀鹽
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354
|
415
|
10x50 ug
|
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21020
|
Fura-2，AM * CAS 108964-32-5 *
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363
|
512
|
1mg
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21021
|
Fura-2，AM *超純級(jí)* * CAS 108964-32-5 *
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363
|
512
|
1mg
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21022
|
Fura-2，AM * CAS 108964-32-5 *
|
363
|
512
|
50mg
|
|
21023
|
Fura-2，AM *超純級(jí)* * CAS 108964-32-5 *
|
363
|
512
|
20x50 ug
|
|
21025
|
Fura-2，五鉀鹽* CAS 113694-64-7 *
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21026
|
Fura-2，五鈉鹽
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21027
|
Fura-FF，AM* CAS 348079-12-9 *
|
363
|
512
|
10x50 ug
|
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21028
|
Fura-FF，五鉀鹽* CAS 192140-58-2 *
|
363
|
512
|
10x50 ug
|
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21029
|
Fura-FF，五鉀鹽* CAS 192140-58-2 *
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363
|
512
|
1mg
|
|
21030
|
Indo-1, AM* CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
1mg
|
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21032
|
Indo-1, AM*超純級(jí)* * CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21033
|
Indo-1, AM* CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
50mg
|
|
21036
|
Indo-1, AM*超純級(jí)* * CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
20x50 ug
|
|
21040
|
Indo-1,五鉀鹽* CAS 132319-21-9 *
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21044
|
Indo-1，五鈉鹽
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21045
|
Fura Red,鉀鹽
|
458
|
597
|
1mg
|
|
21046
|
Fura Red，AM * CAS 149732-62-7 *
|
458
|
597
|
1mg
|
|
21047
|
Fura Red, 鉀鹽
|
458
|
597
|
10x50 ug
|
|
21048
|
Fura Red, AM *CAS 149732-62-7*
|
458
|
597
|
10x50 ug
|
|
21050
|
Quin-2，AM * CAS 83104-85-2 *
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353
|
495
|
1mg
|
|
21052
|
Quin-2四鉀鹽* CAS 149022-19-5 *
|
353
|
495
|
5mg
|
|
21055
|
Fura-8 ，AM
|
354
|
525
|
1mg
|
|
21056
|
Fura-8 ，AM
|
354
|
525
|
10x50 ug
|
|
21057
|
Fura-8 ，五鉀鹽
|
354
|
525
|
1mg
|
|
21058
|
Fura-8 ，五鈉鹽
|
354
|
525
|
1mg
|
|
36320
|
Screen Quest 免洗Fura-2鈣檢測(cè)試劑盒
|
370
|
476
|
10Plates
|
|
36321
|
Screen Quest 免洗Fura-2鈣檢測(cè)試劑盒
|
370
|
476
|
100Plates
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