可用于多種生物學(xué)應(yīng)用的花青染料
今天百螢給大家?guī)Я说氖腔ㄇ嗨丶捌溲苌锏慕榻B和推薦。與其他經(jīng)典熒光染料相比，花青染料的熒光信號如何？可用于哪些領(lǐng)域？光譜性質(zhì)是怎樣的？效果良好的花青類產(chǎn)品都有哪些？能修飾哪些反應(yīng)基團(tuán)？感興趣的朋友一起來看看吧！
熒光素及其衍生物
“花青”這個名詞是來自于聚次甲基組合成染料家族中的，它是一個非系統(tǒng)名稱，cyanin一詞源自英語單詞“ cyan”，通常表示藍(lán)綠色。 花青染料的摩爾消光系數(shù)（約150,000至300,000 M-1cm-1）非常大，結(jié)合適度的量子產(chǎn)率，使它可以產(chǎn)生極其明亮的熒光信號。 事實(shí)證明，花青在許多領(lǐng)域都非常有用，包括成像技術(shù)，生物學(xué)，激光技術(shù)和分析化學(xué)等。 AAT Bioquest提供了*多的花青染料集合，它們可用作多種生物學(xué)應(yīng)用的分子探針。 對于某些生物學(xué)應(yīng)用，花青可以有利地替代其他常規(guī)染料，例如熒光素和羅丹明。
花青染料Cy3和Cy5
圖1.Cy3（左），Cy5（中）和Cy7（右）染料的*大吸光度（虛線）和發(fā)射光（陰影區(qū)域）。
在花青染料中，*受歡迎的是發(fā)出黃綠色熒光（約550 nm激發(fā)，約570 nm發(fā)射）的Cy3和在紅色部分發(fā)出熒光（約650 nm激發(fā)，約670 nm發(fā)射）的Cy5。 由于它們的光譜重疊極小，通常將Cy3和Cy5結(jié)合起來進(jìn)行檢測。Cy3可以通過各種熒光儀，成像儀和帶有TRITC標(biāo)準(zhǔn)濾波片的顯微鏡進(jìn)行檢測。 由于其較高的摩爾消光系數(shù)，Cy3染料也很容易在電泳凝膠和溶液中用肉眼觀察。 Cy5的消光系數(shù)也非常高（在凝膠電泳中肉眼可檢測到1 nmol），并且在紅色部分具有*大的熒光發(fā)射峰，因此Cy5成為了紅色熒光染料的流行替代品。
光譜性質(zhì)
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產(chǎn)品名稱
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激發(fā)光線
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Ex / Em（nm）
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濾波片組
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消光系數(shù)（ε）
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量子產(chǎn)率（Φ）
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Cy3
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532nm
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554/568nm
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Cy3 / TRITC
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150,000
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0.15
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Cy5
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633-647nm
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650/669nm
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Cy5
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250,000
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0.27
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Cy7
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730nm
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754/778nm
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Cy7
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250,000
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0.3
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磺化與非磺化花青
磺化和非磺化花青染料具有非常相似的熒光特性，在許多應(yīng)用中它們可以互換使用。染料之間的差別主要在于它們的溶解度。在標(biāo)記生物分子之前，非磺化花青必須溶解在有機(jī)溶劑中，如DMF或DMSO。而磺化花青可用于水性條件（帶電荷的磺酸鹽基團(tuán)可減少染料和共軛物的聚集）。為了通過對水或水緩沖液的透析純化，必須使用磺化花青有效去除未反應(yīng)的染料。通過凝膠過濾、色譜或電泳純化對磺化和非磺化菁都是合適的。
表2.磺化和非磺化Cy3，Cy5和Cy7染料的光譜比較。
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Cy3
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Cy5
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Cy7
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形式
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磺化
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非磺化
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磺化
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非磺化
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磺化
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非磺化
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Ex / Em（nm）
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554/568
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650/669
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754/778
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過濾片組
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Cy/ TRITC
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Cy5
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Cy7
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ε(消光系數(shù) cm-1M-1)
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150,000
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140,000
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250,000
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230,000
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250,000
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250,000
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Φ(熒光量子產(chǎn)率)
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0.10
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0.07
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0.27
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0.16
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0.12
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0.2
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貨號
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263
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191
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268
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195
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161
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198
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花青產(chǎn)品類型
我們提供多種花青產(chǎn)品選擇，包括用于標(biāo)記生物分子，綴合物，指示劑等的活性染料和結(jié)合試劑盒。
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花青抗體/蛋白標(biāo)記試劑盒
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用于細(xì)胞凋亡檢測的Annexin V綴合物
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串聯(lián)染料
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DIGE花青染料
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花青標(biāo)記的酪胺
花青反應(yīng)性染料
用于修飾以下反應(yīng)基團(tuán)的Cy染料標(biāo)記的化學(xué)試劑：
花青染料標(biāo)記的熒光二抗綴合物
從多種花青標(biāo)記的熒光二抗和鏈霉親和素偶聯(lián)物中選擇，用于一抗的信號放大檢測：
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