Caspase3活性檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理與注意事項(xiàng)
Caspase3活性檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理是利用Caspase3催化底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp?p-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA)產(chǎn)生黃色的游離硝基笨胺pNA?(p-nitroaniline)，通過(guò)測(cè)定分光光度比色法測(cè)定pNA在400~410nm處吸光值，從而間接獲得Caspase3的活性。
Caspase3活性檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng)：? 1、?建議每次測(cè)定時(shí)都做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，以使標(biāo)準(zhǔn)更準(zhǔn)確，另外標(biāo)準(zhǔn)品需避免反復(fù)凍融。
2、?如果沒(méi)有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定，但應(yīng)考慮根據(jù)比色杯的 *小檢測(cè)體積，盡量采用100μl體積以?xún)?nèi)的比色環(huán)。?
3、?所測(cè)樣品的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的上限，應(yīng)用裂解液稀釋樣品后重新測(cè)定。?
4、?樣品蛋白有效含量過(guò)低或Caspase激活水平過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致實(shí)際測(cè)得的A405過(guò)低， 應(yīng)注意使蛋白濃度盡量達(dá)到1~3μg/ml，調(diào)整誘導(dǎo)凋亡的時(shí)間和條件。?
5、?為了您的**和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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