D蟲熒光素鉀鹽是螢火蟲熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。反應(yīng)原理：首先，在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應(yīng)，接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測定細(xì)胞活力以及**計(jì)數(shù)。它還用于報(bào)告基因檢測。可與小動物活體成像系統(tǒng)配套使用，用于標(biāo)記LUC基因后的體內(nèi)活體熒光檢測。
D蟲熒光素鉀鹽使用方法：
1. 活體成像分析方法
（1） 用DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配置D-Luciferin工作液（15mg/mL）* ，0.2 μm濾膜無菌過濾。
（2） 注射量：10μL/g的體重，如10g 重小鼠，注射100μL 工作液（1.5 mg D-Luciferin）。
（3） 腹腔注射10～15分鐘后，上機(jī)進(jìn)行圖像分析。
2. 體外分析方法
（1） 用無菌水配置200× 的D-Luciferin儲備液（30mg/mL）*，立即使用，或-20℃保存。
（2） 用預(yù)熱好的完全培養(yǎng)基1∶200稀釋D-Luciferin儲備液，配置工作液（150μg/mL）。
（3） 去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。
（4） 進(jìn)行圖像分析前，向細(xì)胞中添加1× 的D-Luciferin工作液，進(jìn)行圖像分析**。
* ：溶解D-Luciferin時(shí)要完全。
**：在圖像分析前，將細(xì)胞進(jìn)行37℃的短時(shí)間培養(yǎng)可以增加信號強(qiáng)度。
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