AAT Bioquest 生產(chǎn)的小麥胚芽凝集素（WGA）能與N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合，是目前研究較多且有用的凝集素之一。小麥胚芽凝集素可用于標(biāo)記細(xì)胞膜（如：活細(xì)胞、固定細(xì)胞、組織切片、酵母、革蘭氏陽(yáng)性**及**等 ），從而進(jìn)行熒光成像和分析。也可用于**熒光（IF）、**組織化學(xué)（IHC）和流式細(xì)胞術(shù)（FC）。
圖1.HeLa 細(xì)胞用濃度為 10 μg/mL 的 mFluor? Violet 450小麥胚芽凝集素 (WGA) 探針染色 30 分鐘。使用配備紫羅蘭濾光片組的熒光顯微鏡獲取的圖像。
mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針優(yōu)勢(shì)：
1.應(yīng)用廣泛；
2.不受膜電位控制；
3.用于細(xì)胞膜表面的標(biāo)記，有助于膜結(jié)構(gòu)的成像
mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針參數(shù)
Ex(nm)
|
406
|
Em(nm)
|
445
|
溶劑
|
Water
|
存儲(chǔ)條件
|
在-15℃以下保存，避光防潮
|
mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針適用儀器
熒光顯微鏡
Ex
|
406nm
|
Em
|
445nm
|
推薦孔板
|
黑色透明底板
|
mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針實(shí)驗(yàn)方案
樣品分析方案
溶液配制
儲(chǔ)備溶液配制
mFluor 450 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲(chǔ)備液 (200X)
將 500 μL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲(chǔ)備溶液。
注意：重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲(chǔ)存，或在 -20 °C 下長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
工作溶液配制
mFluor 450 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物工作溶液 (1X)
將 5 μL 200X WGA 儲(chǔ)備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。
注意：不同細(xì)胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。 活細(xì)胞的推薦起始濃度為 5-10 μg/mL。
操作方案
活細(xì)胞染色
1. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。
2. 添加 100 μL mFluor 450-WGA 工作溶液。
3. 將細(xì)胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。
4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。
5. 使用 Ex/Em = 406/445 nm在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。
固定細(xì)胞染色
1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細(xì)胞。
注意：對(duì)于固定細(xì)胞膜染色，建議在沒(méi)有透化步驟的情況下進(jìn)行染色。固定后透化步驟會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。
2. 添加 100 μL mFluor 450-WGA 工作溶液。
3. 在室溫下，用 WGA 工作溶液孵育細(xì)胞 10-30 分鐘。
4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。
5. 使用Ex/Em = 406/445 nm在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。