鈣離子熒光探針Fluo4組織切片
A. 鈣離子熒光探針Fluo4對(duì)于任何常見切片,處理至常規(guī)可以進(jìn)行**染色時(shí),或完成常規(guī)的**染色后,即可進(jìn)行后續(xù)的Hoechst染色。
B. PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘,吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床,或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次??稍诹装逯胁僮?。
C. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分鐘。也宜用搖床,或手動(dòng)晃動(dòng)。
D. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘。
E. 將切片置于載玻片上,滴一滴抗淬滅封片液,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡。
F. 熒光顯微鏡可檢測到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長在350nm左右,發(fā)射波長在460nm左右,
鈣離子熒光探針Fluo4的吸收光譜和發(fā)射光譜,左側(cè)峰為吸收光譜,右側(cè)峰為發(fā)射光譜。
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