EDANS，F(xiàn)AM，TAMRA，ROX，Cy3的®和Cy5 ®已廣泛用于開發(fā)各種FRET肽和FRET寡核苷酸染料，但是這些染料的使用仍存在一些局限性。例如，EDANS的弱吸收和環(huán)境敏感熒光嚴重限制了其開發(fā)蛋白酶測定和核酸檢測染料的靈敏度。與EDANS相比，熒光素基染料（如FAM，HEX，JOE和TET）具有更強的吸收和熒光。然而，熒光素染料的熒光亮度依賴于pH。它們僅在較高pH下表現(xiàn)出*亮的熒光。此外，大多數(shù)熒光染料具有相當(dāng)?shù)偷墓夥€(wěn)定性，這限制了它們在熒光成像中的應(yīng)用。
在花青染料中，非磺化Cy3 ®和Cy5 ®被廣泛地用于檢測各種肽和寡核苷酸的染料，但它們在水介質(zhì)中相當(dāng)?shù)偷臒晒饬孔赢a(chǎn)率。與非磺酸鹽氰化物相比，磺化Cy3®和Cy5®的熒光量子產(chǎn)率得到改善。Alexa Fluor TM染料有所改善，但是非常昂貴，因此在某些情況下制備肽和寡核苷酸綴合物是不實用的。
為了解決這些問題，AAT Bioquest開發(fā)了Tide Fluor?染料，該染料被優(yōu)化為用于各種生物學(xué)應(yīng)用的FRET肽和FRET寡核苷酸的構(gòu)建基塊。我們的Tide Fluor?染料（如TF1，TF2，TF3，TF4，TF5，TF6，TF7和TF8）具有強熒光和良好的光穩(wěn)定性。TF2染料具有與羧基熒光素（FAM）相似的激發(fā)和發(fā)射波長，更方便用熒光素進行的生物學(xué)應(yīng)用。TF2染料在常規(guī)條件下具有更強的熒光，并且比FAM染料更具光穩(wěn)定性。與替代熒光素和Cy染料的其他熒光染料（如AlexaFluor®和DyLight?染料）相比，Tide Fluor?染料具有更高的效益，具有與您所需生物應(yīng)用相當(dāng)甚至更好的性能。
如上所述，Tide Fluor?染料具有與AlexaFluor®染料幾乎相同的光譜性質(zhì)。然而，然而，在寡核苷酸和肽上，TF3染料比Cy3®，AlexaFluor®555和DyLight?555更亮，更光穩(wěn)。我們建議您嘗試我們的Tide Fluor?染料，這些染料經(jīng)過優(yōu)化，可以低成本標(biāo)記寡核苷酸和多肽，性能與AlexaFluor®染料相當(dāng)。
Tide Fluor?染料的主要特點
· 優(yōu)化配合Tide Quencher?深色接收器
· 更強的熒光亮度，以提高檢測靈敏度
· 對pH和環(huán)境都不敏感的熒光
· 提高熒光成像的光穩(wěn)定性
· 可調(diào)節(jié)的水溶性
· 可用于撮合的各種反應(yīng)形式
圖1. Tide Fluor?染料的標(biāo)準化熒光光譜。
表1. 常見染料的和Tide Fluor?染料。
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如果你正在用
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你可以嘗試 Tide Fluor? 染料
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Alexa Fluor® 350, AMCA, DyLight? 350
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Tide Fluor? 1 [TF 1]
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Alexa Fluor® 488, Cy2®, FITC, DyLight? 488
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Tide Fluor? 2 [TF 2]
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Alexa Fluor® 555, Cy3®, DyLight? 550, TRITC
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Tide Fluor? 3 [TF 3]
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Alexa Fluor® 594, DyLight? 594, Texas Red®
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Tide Fluor? 4 [TF 4]
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Alxea Fluor® 647, Cy5®, DyLight? 650
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Tide Fluor? 5 [TF 5]
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Alexa Fluor® 680, Cy5.5®, IRDye® 700, DyLight? 680
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Tide Fluor? 6 [TF 6]
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Alexa Fluor® 750, Cy7®, DyLight? 750
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Tide Fluor? 7 [TF 7]
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Alexa Fluor® 790, DyLight? 800, IRDye® 800
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Tide Fluor? 8 [TF 8]
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表2.用于檢測FRET的Tide Fluor?染料。
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Tide Fluor?系列產(chǎn)品
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Ex（nm）
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Em（nm）
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優(yōu)點
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訂購信息
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Tide Fluor?1（TF1）
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345
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442
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EDANS的替代品
· 吸收力更強
· 更強的熒光
· 環(huán)境敏感度較低
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Cat＃2236（TF1疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2237（TF1炔烴，點擊化學(xué)）
Cat＃2238（TF1酸）
Cat＃2239（TF1胺）
Cat＃2242（TF1馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2244（TF1 SE，NH2-反應(yīng)性）
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Tide Fluor?2（TF2）
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500
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527
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替代FAM，F(xiàn)ITC和Alexa Fluor® 488
· 對pH不敏感的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2245（TF2酸）
Cat＃2246（TF2胺）
Cat＃2247（TF2馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2248（TF2SE，NH2-反應(yīng)性）
Cat＃2252（TF2疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2253（ TF2炔烴，點擊化學(xué)）
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Tide Fluor?2WS（TF2WS）
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502
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525
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替代Alexa Fluor® 488
· 對pH不敏感的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2348（TF2WS酸）
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Tide Fluor?3（TF3）
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555
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584
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替代的Cy3 ®和Alexa Fluor ®555
· 強烈的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2254（TF3疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2255（TF3炔烴，點擊化學(xué)）
Cat＃2268（TF3酸）
Cat＃2269（TF3胺）
Cat＃2270（TF3馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2271（TF3） SE，NH2-反應(yīng)性）
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Tide Fluor?3WS（TF3WS）
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555
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565
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替代的Cy3 ®和Alexa Fluor ®555
· 強烈的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2345（TF3WS酸）
Cat＃2346（TF3WS SE，NH2-反應(yīng)性）
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Tide Fluor?4（TF4）
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590
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618
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替代ROX，德克薩斯紅®和Alexa Fluor ® 594
· 強烈的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2285（TF4酸）
Cat＃2286（TF4胺）
Cat＃2287（TF4馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2289（TF4SE，NH2-反應(yīng)性）
Cat＃2300（TF4疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2301（ TF4炔烴，點擊化學(xué)）
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Tide Fluor?5WS（TF5WS）
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649
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664
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替代的Cy5 ®和Alexa Fluor ®647
· 強烈的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2275（TF5WS疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2276（TF5WS炔烴，點擊化學(xué)）
Cat＃2278（TF5WS，酸）
Cat＃2279（TF5WS胺）
Cat＃2280（TF5WS馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2281（ TF5WS SE，NH2-反應(yīng)性）
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Tide Fluor?6WS（TF6WS）
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676
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695
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替代經(jīng)Cy5.5 ®，的IRDye ®700和Alexa Fluor ® 680
· 強烈的熒光
· 耐光
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Cat＃2291（TF6WS酸）
Cat＃2292（TF6WS胺）
Cat＃2293（TF6WS馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2294（TF6WS SE，NH2-反應(yīng)性）
Cat＃2302（TF6WS疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2303（ TF6WS炔烴，點擊化學(xué)）
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Tide Fluor?7WS（TF7WS）
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749
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775
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替代Cy7的®和Alexa Fluor ®750
· 強烈的熒光
· 光穩(wěn)定性好
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Cat＃2304（TF7WS疊氮化物，點擊化學(xué)）
Cat＃2305（TF7WS炔烴，點擊化學(xué)）
Cat＃2330（TF7WS酸）
Cat＃2331（TF7WS胺）
Cat＃2332（TF7WS馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2333（TF7WS） SE，NH2-反應(yīng)性）
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Tide Fluor?8WS（TF8WS）
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775
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807
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替代的IRDye ® 800
· 更強的熒光
· 光穩(wěn)定性更高
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Cat＃2306（TF8WS疊氮化合物，點擊化學(xué)）
Cat＃2307（TF8WS炔烴，點擊化學(xué)）
Cat＃2335（TF8WS酸）
Cat＃2336（TF8WS胺）
Cat＃2337（TF8WS馬來酰亞胺，SH-反應(yīng)性）
Cat＃2338（TF8WS） SE，NH2-反應(yīng)性）
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