DNA編碼所有遺傳信息,是創(chuàng)造所有生物生命的藍(lán)圖。它充當(dāng)遺傳物質(zhì)在世代之間傳遞的存儲設(shè)備,RNA充當(dāng)DNA中存儲的藍(lán)圖的讀取器。儲存在DNA中的遺傳信息由RNA攜帶,在核糖體形成蛋白質(zhì)的過程中充當(dāng)信使。這整個過程稱為分子生物學(xué)的“中心教條”。由于核酸分析的范圍繼續(xù)擴(kuò)大,在核酸檢測方法的選擇上也是五花八門。影響檢測方法選擇的關(guān)鍵因素包括穩(wěn)定性、靈敏度、速度和方便性,以及檢測試劑和檢測系統(tǒng)的總成本。核酸超靈敏分析的原因包括單細(xì)胞和稀有細(xì)胞的遺傳物質(zhì)分析,如母體循環(huán)中的滋養(yǎng)細(xì)胞,以及單拷貝基因檢測。此外,更好的檢測方法可以提供一種需要較少擴(kuò)增周期的分析途徑,或者消除核酸擴(kuò)增反應(yīng)的多周期方案(例如,PCR)。盡管許多檢測技術(shù),如基于化學(xué)發(fā)光的檢測技術(shù),在未來可能會發(fā)揮重要作用,但目前熒光技術(shù)仍然是核酸分析中應(yīng)用*廣泛的檢測技術(shù)。
DNA和RNA定量試劑
Helixyte 綠色dsDNA定量試劑(Cat#17597)和StrandBrite 綠色RNA定量試劑(Cat#17611)分別對雙鏈DNA和單鏈RNA進(jìn)行了優(yōu)化。它們對核酸有很高的親和力,對結(jié)合核酸有極大的熒光增強作用,使得在幾分鐘內(nèi)直接檢測復(fù)雜溶液中微量核酸成為可能,而且一般不會受到其他生物分子的干擾。
圖1.小牛胸腺DNA中使用Helixyte 綠色和PicoGreen進(jìn)行DNA定量。由圖看出Helixyte 綠色和PicoGreen 具有幾乎相同的性能。
Helixyte Green是一種出色的核酸定量試劑,與dsDNA結(jié)合后可顯著增強熒光。它具有與PicoGreen®相同的光譜特性,因此是PicoGreen®的**替代品(PicoGreen®是Invitrogen的商標(biāo))。它是可用于定量溶液中DNA的*敏感的染色劑之一。使用Helixyte Green,您可以在ssDNA,RNA和游離核苷酸存在的情況下選擇性地檢測低至25 pg / ml的dsDNA。該測定法在三個數(shù)量級上是線性的,并且?guī)缀鯖]有序列依賴性,使您能夠準(zhǔn)確地測量來自多種來源的DNA,包括基因組DNA,病毒DNA,微量制備DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。
在進(jìn)行Northern雜交分析、S1核酸酶分析、RNase保護(hù)分析、cDNA文庫制備、反轉(zhuǎn)錄PCR之前,檢測和定量少量RNA對于多種分子生物學(xué)過程非常重要,例如測量體外轉(zhuǎn)錄RNA的產(chǎn)量和測量RNA濃度。測量核酸濃度*常用的技術(shù)是在260nm處測定吸光度,吸光度法的主要缺點是蛋白質(zhì)、游離核苷酸和其他紫外線吸收化合物的干擾,但使用敏感的熒光核酸試劑可以緩解這種干擾問題。StrandBrite RNA定量試劑是一種用于溶液中RNA定量的超靈敏熒光核酸染料。StrandBrite RNA定量試劑可以用熒光酶標(biāo)儀或熒光分析儀檢測到低至5ng/mL的RNA。
Helixyte 綠色 dsDNA和StrandBrite 綠色 RNA定量試劑的優(yōu)勢:
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高靈敏度:Helixyte 綠色和StrandBrite 綠色的靈敏度比UV吸收率測定法高10,000倍。
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選擇性高:與紫外吸收的測量不同,這些檢測不受蛋白質(zhì),游離核苷酸或非常短的寡核苷酸的影響,從而使完整的寡核苷酸和核酸的定量在復(fù)雜混合物(例如血清或全血)中更加準(zhǔn)確。
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操作簡單:這些檢測方法非常簡單,不需要分離步驟,因此非常適合自動化,高通量篩選。
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檢測范圍廣:對于Helixyte 綠色的檢測,定量在四個數(shù)量級內(nèi)都是準(zhǔn)確的?;赟trandBrite 的熒光檢測在三個數(shù)量級上都是準(zhǔn)確的。
相關(guān)產(chǎn)品推薦
表1.dsDNA定量相關(guān)產(chǎn)品
貨號#
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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17520
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細(xì)胞核染料 Hoechst 33258 CAS 23491-45-4
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100 mg
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17523
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細(xì)胞核染料Hoechst 33258 CAS 23491-45-4
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1g
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17530
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細(xì)胞核染料Hoechst 33342 CAS 23491-52-3
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100 mg
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17533
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細(xì)胞核染料Hoechst 33342 CAS 23491-52-3
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1 g
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17537
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細(xì)胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0
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5 mg
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17597
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Helixyte Green 雙鏈DNA定量試劑
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1 ml
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17598
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Helixyte Green 雙鏈DNA定量試劑
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10 ml
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17650
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Helixyte Green 雙鏈DNA熒光定量試劑盒 適合酶標(biāo)儀檢測檢測
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200 tests
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17651
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Helixyte Green 雙鏈DNA熒光定量試劑盒
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200 tests
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表2.RNA定量相關(guān)產(chǎn)品
貨號#
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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17610
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StrandBrite 綠色RNA定量試劑 200X DMSO溶解
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1 ml
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17611
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StrandBrite 綠色RNA定量試劑*200X DMSO溶解
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10 ml
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17655
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StrandBrite 綠色熒光RNA定量試劑盒 適合于酶標(biāo)儀
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1000 tests
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17656
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StrandBrite 綠色熒光RNA定量試劑盒
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100 tests
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17657
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StrandBrite 綠色熒光RNA定量試劑盒 高選擇性
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100 tests
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