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酪胺細(xì)胞信號放大技術(shù)——TSA/PSA是一種成熟的細(xì)胞信號放大技術(shù)，當(dāng)TSA/PSA與我們光穩(wěn)定性、水溶性**的iFluor染料結(jié)合后，產(chǎn)生的熒光信號具有比傳統(tǒng)**組織化學(xué)、**細(xì)胞化學(xué)和**熒光方法產(chǎn)生的信號更高的**度和靈敏度。PSA是美國AAT Bioquest自主研發(fā)的與TSA功能類似的信號放大方法，其熒光信號強度比廣泛使用的tyramide（TSA）試劑高10-50倍。

酪胺信號放大（TSA）是一種基于辣根過氧化酶（HRP）的催化活性對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。原理為酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(yīng)（已標(biāo)記熒光的酪胺在HRP催化H2O2下形成共價鍵結(jié)合位點）產(chǎn)生的大量酶促產(chǎn)物與目標(biāo)蛋白的酪氨酸殘基共價結(jié)合，從而使目標(biāo)蛋白標(biāo)記上特異的熒光或生物素。左圖：使用iFluor 488 酪胺染色甲醛固定的石蠟包埋人肺腺癌陽性組織細(xì)胞結(jié)果圖。

工作原理

1. 固定、透化和封閉細(xì)胞或組織樣品。 用未標(biāo)記的一抗/生物素化一抗或生物素化核酸探針孵育樣品
2. 加入HRP二抗或HRP-鏈霉親和素偶聯(lián)物
3. 添加iFluor 酪胺工作溶液，孵育得到HRP催化的酪胺
4. 加入樣品并檢測信號

TSA與PSA特點比較

產(chǎn)品實驗對比圖

圖1.分別用iFluor 488 酪胺和Alexa Fluor 488 酪胺染色甲醛固定的石蠟包埋人肺腺癌陽性組織的染色結(jié)果圖。人肺腺癌陽性組織切片用兔抗EpCam抗體染色，然后用HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG二抗孵育。顯影：iFluor 488 酪胺（左）；Alexa Fluor 488 酪胺（右）。核染色：DAPI	圖2.分別用iFluor 488 PSA和Alexa Fluor 488 TSA染色甲醛固定的石蠟包埋人肺腺癌陽性組織的染色結(jié)果圖。人肺腺癌陽性組織切片用兔抗EpCam抗體染色，然后用polyHRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG二抗孵育，*后使用iFluor 488 PSA （Cat#45020）和Alexa Fluor 488 TSA分別染色。圖像顯示iFluor 488 PSA與Alexa Fluor 488 TSA相比提高了熒光IHC的靈敏度。
圖3.使用iFluor PSA 成像試劑盒對甲醛固定，石蠟包埋的人肺腺癌進(jìn)行順序**染色。 （1.）用兔抗EpCam抗體和帶有山羊抗兔IgG（#45205）的iFluor 488 PSA 成像試劑盒標(biāo)記EpCam，然后洗滌。 （2.）Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗體和iFluor 555 帶有山羊抗小鼠IgG 的PSA 成像試劑盒（#45270）標(biāo)記。（3.）細(xì)胞核用DAPI（#17507）標(biāo)記。（4.）*終在共聚焦顯微鏡上采集圖像。

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