1. 百螢Cell Meter TUNEL概述
DNA片段化代表晚期細(xì)胞凋亡的特征。凋亡細(xì)胞中的DNA斷裂可通過(guò)末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TUNEL）檢測(cè)。 TUNEL測(cè)定法依賴于DNA中存在的缺口，該缺口可通過(guò)TdT進(jìn)行鑒定，TdT是一種酶，該酶催化添加標(biāo)記物的dUTP的添加。現(xiàn)有的所有TUNEL分析均包含劇毒的椰油酸鈉，這可能會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并降低DNA的產(chǎn)生和DNA鏈。我們的Cell Meter?TUNEL細(xì)胞凋亡測(cè)定試劑盒使用了不含甲藻酸鈉的專有緩沖系統(tǒng)。該試劑盒基于將我們獨(dú)特的專有熒光染料摻入凋亡過(guò)程中形成的DNA片段中。該測(cè)定法經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可在不使用抗體的情況下直接檢測(cè)分離的或附著的細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡。該試劑盒可提供所有必需成分，并具有優(yōu)化的測(cè)定方案。適用于熒光酶標(biāo)儀，熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀。
2. 百螢Cell Meter TUNEL參數(shù)
E x(nm) 549
E m(nm) 648
存儲(chǔ)條件 在零下15度以下保存，避免光照
3. 百螢Cell Meter TUNEL適用儀器
流式細(xì)胞儀
E x: 488nm
E m: 660/20nm
通道: PE-Cy5通道
熒光顯微鏡
Ex: TRITC濾波片組
Em: TRITE濾波片組
推薦孔板: 黑色透明底板
熒光酶標(biāo)儀
Ex: 550nm
Em: 590-650nm
Cutoff: 570nm
推薦孔板: 純黑色孔板
圖1.與未處理的對(duì)照相比，用 100 nM 或 1 μM 星形孢菌素 (SS) 處理 4 小時(shí)后 HeLa 細(xì)胞中 TUNEL 反應(yīng)的熒光圖像。細(xì)胞與 TUNEL 工作溶液在 37oC 下孵育 1 小時(shí)。使用具有 TRITC 濾光片組的熒光顯微鏡分析紅色熒光信號(hào)。熒光標(biāo)記的 DNA 鏈斷裂在 SS 處理的細(xì)胞中顯示出強(qiáng)烈的熒光染色。
圖2. TUNEL 染色定義的 BM 中凋亡的 PCa 細(xì)胞。PCa細(xì)胞被泛細(xì)胞角蛋白識(shí)別為綠色，TUNEL信號(hào)以紅色顯示。比例尺，20 微米。資料來(lái)源：Axl 是 TGF-β2 誘導(dǎo)的骨髓中前列腺癌細(xì)胞休眠所必需的， Yumoto 等人，《科學(xué)報(bào)告》，2016 年 11 月。